液相色譜儀的檢測原理是基于混合物中各組分在液 - 固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進(jìn)行分離后分析鑒定。具體過程如下:
進(jìn)樣系統(tǒng):將待分離的樣品以微量注入液相色譜柱中。進(jìn)樣系統(tǒng)有進(jìn)樣器和自動進(jìn)樣器等類型,自動進(jìn)樣器可自動完成多個樣品的連續(xù)進(jìn)樣操作。
色譜柱:是實現(xiàn)色譜分離的核心部分,通常由不同的填料(如各種材料的顆粒)填充而成,也有開放式管道(開放管柱)。當(dāng)樣品進(jìn)入柱子后,樣品分子與填料發(fā)生分配、吸附等相互作用,從而實現(xiàn)分離。不同的物質(zhì)由于與固定相的相互作用不同,在色譜柱中的保留時間也不同,進(jìn)而實現(xiàn)分離。
移相系統(tǒng):主要由流動相(液相)的泵、溶液容器、控制器等組成,負(fù)責(zé)將流動相送入柱子,并在柱子中進(jìn)行分離。液相色譜中的移相方式有梯度洗脫法、等溫洗脫法、等時洗脫法等。
檢測器:用于檢測某個化合物在液相色譜柱中的存在與否及其相對濃度的大小。常見的檢測器有紫外吸收檢測器、熒光檢測器、電化學(xué)檢測器等。當(dāng)樣品成分經(jīng)過檢測器時,檢測器將其信號轉(zhuǎn)化為電信號,通過放大、濾波等處理后,傳輸?shù)接嬎銠C(jī)系統(tǒng)。
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):由計算機(jī)、色譜軟件等組成,可以對檢測結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析,如生成色譜圖、峰面積計算、峰高度計算、定量分析等。
總之,液相色譜儀利用各組分在固定相和流動相之間的分配和吸附等物理化學(xué)作用的差異,使樣品在色譜柱中被分離成不同的成分,再通過檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行檢測和分析。
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